操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè)，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
急性母細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱：

Goat Anti Mouse IgG-Biotin(Ready to Use)/山羊抗鼠IgG,Biotin(IHC工作液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)

CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ)/CHO Medium Base厭氧的糖生化反應(yīng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

黑曲霉 Aspergillus niger大麗輪枝 Verticillium dahliea Kleb

成骨肉瘤細(xì)胞英文名稱：MG-63

蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae木霉

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系

大鼠肺成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

胚肺成纖維樣細(xì)胞（男）英文名稱：HEL1

乙醇脫氫酶1(ADH1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alcohol Dehydrogenase 1 (ADH1)

大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum嗜酸桿 Lactobacillus acidophilus鈣黃綠素紅Calcein Red

L-丙氨（1KG）L-Alanine， CAS# 56-41-7； MW 89.09； USP

（±）-2-Methyl Arachidonoyl-2’-Fluoroethylamide （1 mg）（±）-N-（2-fluoroethyl）-2-methyl-5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenamide； 2-methyl-2’-fluoro AEA|2-Methyl-2’-fluoro Anandamide|O-689； （±）-2-Methyl Arachidonoyl-2’-Fluoroethylamide

Citreoviridin （1 mg）2,5-anhydro-1,6-dideoxy-2-C-[（8-（4-methoxy-5-methyl-2-oxo-2H-pyran-6-yl）-2-methyl-1E,3E,5E,7E-octatetraen-1-yl]-4-C-methyl-D-iditol

15-keto Fluprostenol （1 mg）（±）15-oxo-9α，11α-dihydroxy-16，16-（3-（trifluoromethyl）phenoxy）-17，18，19，20-tetranor-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15-keto Fluprostenol

15（S）-HpETE （250 ug）15S-hydropeoxy-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenoic acid

L-NNA （5 g）N5-[imino（nitroamino）methyl]-L-ornithine； L-NG-Nitroarginine|NG-nitro-L-Arginine； L-NNA

Cannabidiol （1 mg）2-[1R-3-methyl-6R-（1-methylethenyl）-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-1，3-benzenediol； CBD； Cannabidiol

β-Glycerophosphate （sodium salt hydrate） （50 g）2-（dihydrogen phosphate）-1，2，3-propanetriol， disodium salt， pentahydrate； β-Glycerophosphate （sodium salt hydrate）

Trifluopeazine （hydrochloride） （5 g）10-[3-（4-methyl-1-pipeazinyl）propyl]-2-（trifluoromethyl）-10H-phenothiazine， dihydrochloride； SKF 5019|TFP； Trifluopeazine （hydrochloride）

Sulfosuccinimidyl Oleate （sodium salt） （5 mg）SSO； 1-（oleoyloxy）-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid, monosodium salt

2，4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid （100 mg）2，4-dimethyl-5-thiazolecarboxylic acid； 2，4-Dimethylthiazole-5-Carboxylic Acid

小鼠甘露糖受體C2(MRC2)ELISA試劑盒球孢白僵 Beauveria bassiana威爾酵母 Saccharomyces willianus

可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒英文名稱：Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA Kit規(guī)格:96T/48TⅣ型膠原(Col Ⅳ)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

大鼠軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes

精氨酸加壓素(AVP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human arginine vasopressin,AVP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA Kit，48T/96T特價(jià)促銷

酸球亞種 Lactococcus lactis subsp.lactisBC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)

Smad7 ELISA試劑盒 英文名稱：Human Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠心鈉肽(ANP)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

綠色木霉無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum

內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eS-3)ELISA試劑盒英文名稱：Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit規(guī)格:96T/48Tβ2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA Kit，48T/96T 特價(jià)促銷