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英文簡稱
規(guī)格
貨號
TF-1
1×106
P-X10521
產(chǎn)品詳情：
細胞別稱；TF1; MFD-1；TF-1；人紅白血病細胞
種屬來源；人
年齡性別；男；35歲
組織來源；骨髓
生長特性；半貼半懸
細胞形態(tài)；母細胞樣
細胞代數(shù)；10代以內(nèi)
背景介紹；TF-1細胞系1987年由Kitamura T等建立，源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本，該患者具有嚴(yán)重的全血細胞減少癥。細胞生長完全依賴于IL-3或GM-CSF，對IL-5無反應(yīng)。多種因子和細胞因子對該細胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。該細胞不表達血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由該細胞的形態(tài)和細胞化學(xué)特征及珠蛋白基因的組成性表達，顯示該細胞屬于紅系。氯高鐵血紅素和δ氨基乙酰丙酸誘導(dǎo)細胞合成血紅蛋白，TPA刺激細胞向巨噬細胞樣細胞分化。
STR位點；Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：8，9；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14，16；D21S11：30；D2S1338：19；D3S1358：15；D5S818：13；D7S820：12；D8S1179：11，15；FGA：18，19；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：15，17；
生物等級；1
細胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測；無
保藏機構(gòu)；ATCC; CRL-2003 DSMZ; ACC-334 ECACC; 93022307
培養(yǎng)基；RPMI-1640+10%FBS+2ng/ml rhGM-CSF+1%PS
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細胞處理：
1）凍存細胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實驗原理：
實驗步驟：
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進行細胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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人CD40配體（sCD40L）elisa檢測試劑盒 |
磷酸化賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體 Anti-Phospho-WNK1(Thr60) |
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細胞基質(zhì)金屬 125I同位素標(biāo)記檢測試劑盒 |
鋅指蛋白801抗體 |
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小鼠凝血因子VIIIa輕鏈(F8aLC)elisa生化檢測試劑盒 |
髓鞘蛋白P0樣蛋白3抗體 |
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大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa檢測試劑盒 |
TLX3 |
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MAZ |
T細胞白血病同源盒蛋白3抗體 |
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脫氧鳥苷激酶抗體 |
環(huán)指蛋白75抗體 Anti-ROC1/RNF75 |
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DGUOK |
神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體 Anti-Neurotrimin/HNT |
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神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體 Anti-Syntrophin/SNTA1/Syntrophin Alpha1 |
MPZL3 |
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Alexa Fluor 488標(biāo)記兔IgG（同型對照) |
滑膜肉瘤X染色體相關(guān)2抗體 Anti-SSX2/CT5.2 |
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Rabbit IgG / AF488 |
B細胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子3抗體 Anti-PBX3 |
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鳥苷酸環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體 |
磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) |
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Guanylyl Cyclase alpha 2 |
辣椒素受體3抗體 Anti-TRPV3 |
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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8/Collagenase II)elisa生化檢測試劑盒 |
小鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa生化檢測試劑盒 |
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MMP8 ELISA kit |
人紅系白血病細胞；TF-1 (STR)3-NTELISAKit |
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HRAS樣抑制因子2抗體 |
酰基鞘氨醇脫酰酶2抗體 |
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HRASLS2 |
ASAH2 |