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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
G蛋白偶聯(lián)受體44抗體 |
英文名稱 |
Anti-GPR44/CD294 |
貨號 |
BH-K013629 |
英文名稱 G蛋白偶聯(lián)受體44抗體
中文名稱 G蛋白偶聯(lián)受體44抗體
別 名 CD294; CD294 antigen; Chemoattractant receptor homologous molecule expressed on Th2 cells; chemoattractant receptor-homologous; Chemoattractant receptor-homologous molecule expressed on Th2 cells; CRTH 2; CRTH2; DL1R; DP2 prostaglandin receptor; G Protein Coupled Receptor 44; GPR 44; Gpr44; GPR44_HUMAN; PTGDR2; Putative G protein coupled receptor 44; Putative G-protein coupled receptor 44; GPCR 44.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human GPR44/CD294
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Cullin 1 Cullin1抗體 0.1ml
DRAK2 DAP凋亡誘導蛋白激酶2抗體 0.2ml
Calreticulin 鈣網(wǎng)蛋白抗體 0.2ml
ABCA1/ABC1 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體 0.1ml
MRC1/CD206 巨噬細胞甘露糖受體抗體 0.2ml
Acrosin 頂體前體蛋白抗體 0.2ml
PARG1/Rho GTPase activating protein 29 Rho GTP酶激活蛋白29抗體 0.2ml
DRD3 多巴胺受體D3抗體 0.1ml
phospho-eIF4G(ser1108) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 0.1ml
KDM4C/GASC1/JMJD2C 鱗狀細胞癌增強蛋白1抗體 0.1ml
ACSL1 長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體 0.2ml
alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體 1ml
ALOX15B/15 Lipoxygenase 2 花生四烯酸15脂氧合酶2抗體 0.2ml
G蛋白偶聯(lián)受體44抗體性蘭英文名稱:Acid blueCAS號:2379-74-0分子式:393.31分子量: C18H10Cl2O2S2
丙稀酰胺英文名稱:ExpevimentCAS號:分子式:分子量: CH2=CHCONH2
三乙四胺英文名稱:Three fourCAS號:112-24-3分子式:146.24分子量: C6H18N4
4-羥-8-甲氧-2-甲喹啉分子式:189.21分子量: C11H11NO2英文名稱:4- hydroxy -8- methyl group -2-CAS號:15644-89-0
4-氯-2-甲-噻吩[3,2-D]嘧分子式:184.646分子量: C7H5ClN2S英文名稱:4- -2- methyl thiophene [3,2-D]CAS號:319442-16-5
2-氟-3-三氟甲硝分子式:209分子量: C7H3F4NO2英文名稱:2- three F, -3-CAS號:61324-97-8
(4-甲氧)三氟硼酸鉀分子式:214.04分子量: C7H7BF3KO英文名稱:(4- methoxyphenyl) three kbf4CAS號:192863-36-8
2--5-溴吡分子式:173.01分子量: C5H5BrN2英文名稱:2- amino -5-CAS號:1072-97-5
4-(4-氯)啉分子式:197.66分子量: C10H12ClNO英文名稱:4- (4-) Ma LanCAS號:70291-67-7
5--3-氟吡分子式:112.1050032分子量: C5H5FN2英文名稱:5- amino -3-CAS號:462652-33-1