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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產品僅用于科研實驗。
產品名稱 |
磷酸化埃茲蛋白抗體 |
英文名稱 |
Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) |
貨號 |
BH-K013505 |
英文名稱 磷酸化埃茲蛋白抗體
中文名稱 磷酸化埃茲蛋白抗體
別 名 Ezrin (phospho Y353); Ezrin (phospho Tyr353); p-Ezrin (phospho Y353); CVIL; CVL; cytovillin 2; Cytovillin; DKFZp762H157; FLJ26216; MGC1584; p81; VIL 2; VIL2; Villin 2; Villin2; EZRI_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 心血管 細胞生物 信號轉導 轉錄調節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 64kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Ezrin around the phosphorylation site of Tyr353
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
ARP4 肝血管**素相關蛋白抗體 0.1ml
TBLR1/TBL1XR1 轉導素β1X連鎖受體蛋白1抗體 0.2ml
Shigella tropina 志賀氏體蛋白抗體 1ml
CCL25/TECK 胸腺表達趨化因子抗體 0.2ml
Phospho-cdc25A (Thr506) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
CHRDL2 乳腺腫瘤新因子1抗體 0.1ml
phospho C-Myc(Thr58/pSer62) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 0.1ml
MACC1 結腸癌轉移相關蛋白1抗體 0.2ml
Phospho-ATP1A1(Ser16) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 0.1ml
Calcineurin A/PP-2B alpha 1 鈣調磷酸酶抗體 0.1ml
Bcr Bcr抗體 0.2ml
Cripto 1 monoclonal 畸胎瘤衍化生長因子單克隆抗體 0.2ml
CYP2C19 細胞色素P450 2C19抗體 0.2ml
磷酸化埃茲蛋白抗體1-(3-)-4-(3-氯丙)鹽鹽英文名稱:1- (3- chlorophenyl) -4- (3- 3-chloropropyl) piperazine hydrochlorideCAS號:52605-52-4分子式:309.66分子量: C13H19Cl3N2
新橙皮苷英文名稱:NeohesperidinCAS號:13241-33-3分子式:610.56056分子量:C28H34O15
龍腦英文名稱:BorneolCAS號:507-70-0分子式:154.25分子量:C10H18O
華蟾酥毒英文名稱:CinobufaginCAS號:470-37-1分子式:148.16分子量:C9H8O2
(S,S,S)-2-氮雜雙環(huán)[3,3,0]辛烷-3-羧芐酯鹽鹽英文名稱:(S, S, S) -2- azabicyclo [3,3,0] octane -3- carboxylic acid benzyl ester hydrochlorideCAS號:93779-31-8分子式:281.78分子量: C15H20ClNO2
三氯鉬分子式:202.3分子量: Cl3Mo英文名稱:Three molybdenum chlorideCAS號:13478-18-7
2--3-羥吡分子式:110.11分子量: C5H6N2O英文名稱:2- amino -3- hydroxy pyridineCAS號:16867-03-1
阿拉酸式分子式:分子量:英文名稱:Acid type benzeneCAS號:35272-27-6
穗花牡荊甙英文名稱:Honoka VitexinCAS號:11027-63-7分子式:466.44分子量:C22 H26 O11
二丁酰環(huán)磷腺甙英文名稱:Two D - PCAS號:362-74-3分子式:分子量: C18H24N5O8P