主營產(chǎn)品：
生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
咨詢電話：18117197628
新聞詳情
細(xì)胞凍存的步驟
日期：2025-04-30 05:39
瀏覽次數(shù)：54
摘要：
細(xì)胞凍存的步驟：
1、配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2、取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用 PBS 清洗。
3、去除 PBS，加入適量胰蛋白酶 (覆蓋培養(yǎng)皿表面) 把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4、離心 1000rpm，5min;
5、去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的zui 終密度為 5×106/ml~1×107/ml;
6、將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管 1~1.5 ml;
7、在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作...
細(xì)胞凍存的步驟：
1、配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2、取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用 PBS 清洗。
3、去除 PBS，加入適量胰蛋白酶 (覆蓋培養(yǎng)皿表面) 把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4、離心 1000rpm，5min;
5、去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的zui 終密度為 5×106/ml~1×107/ml;
6、將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管 1~1.5 ml;
7、在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者;
8、凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱 2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。